产品展示
PRODUCT DISPLAY
技术支持您现在的位置:幸运蛋蛋官网 > 技术支持 > 小鼠elisa试剂盒怎样规范操作,且看厂家如何讲解
小鼠elisa试剂盒怎样规范操作,且看厂家如何讲解
  • 发布日期:2019-07-16      浏览次数:49
    •      使用小鼠elisa试剂盒,关注的方面会有很多,每一个细节都有可能影响zui终结果,一般来说小鼠elisa试剂盒的使用包括以下几个步骤:

      小鼠elisa试剂盒



          1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120U/L,80U/L,40U/L,20U/L,10U/L)。
          2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
          3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
          4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
          5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
          6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
          7.温育:操作同3。
          8.洗涤:操作同5。
          9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
          10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
          11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
       
          小鼠elisa试剂盒使用建议:
          1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
          2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
          3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
          4. 请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          6. 底物请避光保存。
          7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
          8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
          9. 本试剂不同批号组分不得混用。
    联系方式
    • 电话

      021-57763112

    • 传真

      86-021-57690166

    在线客服